产品货号：
BTN60202
中文名称：
琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒(柱式吸附)
英文名称：
Agarose gel DNA column Recovery Kit
产品规格：
50次
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本试剂盒用于从琼脂糖凝胶中或DNA反应体系中(如PCR反应体系或DNA连接体系)回收DNA片段。
保存：室温，有效期一年。
本试剂盒足够纯化50片含DNA的琼脂糖凝胶条（每片胶条重量不超过200mg），可以纯化50次酶反应（包括PCR反应，反应体积不超过200μL）。
一、琼脂糖胶回收
二、PCR或其他酶反应回收
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- 高效，回收效率最高可达90%（跟片段大小和胶浓度等因素有关）。
- 快速，整个过程只需要十余分钟。
- 洗脱液不需要额外加乙醇。
- 两用，既可用于DNA片段胶回收，也可以用于PCR或其他酶反应回收。
- 范围广，回收DNA的长度范围为50bp～40 Kb（但回收效率各不相同）。
- 能回收单链、双链及环状DNA（但回收效率各不相同）。最大吸附量为10μg双链DNA。
- 回收的DNA可直接用于酶切、连接、PCR、测序等多种分子生物学实验。
| 组分 | 规格 |
| 通用溶胶液 | 25mL |
| 吸附柱活化液 | 25mL |
| 通用洗柱液 | 50mL |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| DNA洗脱液（胶回收专用） | 10mL |
保存：室温，有效期一年。
本试剂盒足够纯化50片含DNA的琼脂糖凝胶条（每片胶条重量不超过200mg），可以纯化50次酶反应（包括PCR反应，反应体积不超过200μL）。
- 由于通用溶胶液是高盐溶液，因此在低温时容易产生沉淀。如果产生沉淀，需要60℃加热溶解后才可以使用。
一、琼脂糖胶回收
- 用干净的刀片切取含DNA片段的琼脂糖凝胶（100mg左右，尽可能多地把多余的胶切除，否则会影响回收效率），放入一个自备的1.5mL塑料离心管中称重，按重量比为1：2的比例加入通用溶胶液(0.1g的琼脂糖凝胶需要加入0.2mL的通用溶胶液)。如果琼脂糖凝胶的浓度大于2%，则需要按1：3的比例加入通用溶胶液溶解胶块。电泳缓冲液可以用TAE、TBE或其他电泳液。回收效果TAE胶一般好于TBE胶。
- 颠倒10分钟使胶完全溶化，每隔2～3分钟振荡数次以促进琼脂糖凝胶的溶化。如果在10分钟内凝胶溶化不完全，可以60℃金属浴以使胶充分溶化。
- 在等待期间，活化离心吸附柱。在离心吸附柱中加入0.5mL吸附柱活化液，套上收集管后室温放置2分钟，然后12000rpm离心半分钟，倒弃穿透液，再将吸附柱套上收集管后待用。活化后的离心吸附柱必须在当天使用。
- 在上柱前，在溶化的胶中加入相当于胶块体积1/2的异丙醇（对100mg胶块，加50μL），快速振荡10秒混匀。
- 将溶液转移到离心吸附柱中。
- 将离心吸附柱套在收集管上，静置3分钟。本产品提供的离心吸附柱的最大上样体积为0.8mL，若溶胶液的总体积大于0.8mL，一次加不完，可以分多次将溶液加入到吸附柱中。
- 12000g离心1分钟，倒掉收集管中的穿透液。
- 加入0.7mL通用洗柱液于离心柱中，12000g离心1分钟，倒弃收集管中的废液。
- 12000g离心半分钟以去除离心柱中的残留液体。洗脱DNA前的空甩很重要，其目的是去除膜上残留酒精，否则残留酒精会影响后续DNA反应。
- 将离心柱吸附置于一个自备的塑料离心管中，悬空加入50μL DNA洗脱液于离心吸附柱硅胶膜的中央。
- 静置3分钟。
- 室温12000g离心1分钟，离心管底部所得溶液即为纯化的DNA片段，可立即用于后续实验或者放-20℃长期保存。
- 用电泳方法或测OD方法确定回收所得DNA的浓度。
二、PCR或其他酶反应回收
- 按上节第3步活化离心吸附柱。
- 直接在PCR或其他酶反应管中加2倍体积的通用溶胶液，振荡10秒混匀。
- 在反应液和溶胶液的混合液中加入相当于反应体积1/2的异丙醇（对100μL的反应液，加50μL），快速振荡10秒混匀。
- 直接进入上面胶回收操作的第5步并进行后面的操作。
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